《勾魂女郎》的故事发生在抗日战争时期。某市接连出现割喉命案，凶案现场每次都会留下一张梅花Q扑克牌。神探孙少武（陈继铭饰）奉命展开调查，逐渐发现铁燕子（马捷饰）和香雪俱乐部老板香雪（石兰饰）都在寻找死者遗失的翡翠。原来，这块翡翠上刻着有关汪日会谈的机密。
开古玩店的日本特务山本（张中熙饰）唆使铁燕子设局，将孙少武和香雪骗到郊外，自己则趁机潜入警局盗取翡翠，没想到反而中了圈套，险些丧命。孙少武随后潜入铁燕子的住处，却在一场搏斗中发现铁燕子已被人割喉杀害。另一边，香雪盗取翡翠未能得手，只得悻悻离开警局。
随着调查深入，孙少武终于得知，俱乐部中的柳小琼（朱娜饰）才是真正的梅花Q杀手。她的真实身份是日本人缨子，为了替因卷入汪日密谈而被牵连、最终自杀的父亲复仇，她接连杀害了许多无辜的人。
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