《痞子英雄2：黎明升起》中，重案组刑警吴英雄（赵又廷饰）因成功拯救客机而成为警界明星，频频出演警队宣传片，风头一时无两。然而，海港城很快遭遇突如其来的危机，高铁、跨海大桥等重要交通设施接连发生爆炸。吴英雄在追查幕后凶手时，与东区分局刑事侦查组刑警陈真（林更新饰）组成搭档，并再次遇见被迫成为人肉炸弹的通缉犯徐达夫（黄渤饰）。
一切的幕后黑手，是神秘组织“夜行者”。他们绑架了徐达夫等通缉犯的家属，逼迫这些人充当人肉炸弹，炸毁海港城通往外界的各条交通通道，将整座城市变成孤城，随后释放生化病毒，实施企图毁灭城市的“枯草计划”。为了营救徐达夫的妻子杜小晴（关颖饰），并阻止这场灾难，吴英雄与陈真联同鉴识官蓝西英（张钧甯饰）、黑鹰队成员黄世楷（修杰楷饰）等人，向“夜行者”展开正面挑战。
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