绝种铁金刚国语讲述了著名影星詹二帮（梁家辉饰）的故事。他在银幕上经常饰演英勇无畏的英雄，现实中却胆小怕事，深爱他的妻子曼琼（余安安饰）因此离开了他。此后，二帮独自与两个女儿忌廉（钟欣桐饰）和脆皮相依为命。
国际刑警铁男（陈小春饰）与Janet（田朴珺饰）得知恐怖分子龙一（徐锦江饰）即将前往香港取回另一批生化武器。两人在香港追捕恐怖分子时意外闯入二帮家中，铁男更被注射了能导致智力退化的病毒，智商退化至四岁儿童的程度。与此同时，从好莱坞回来的曼琼正准备与二帮商谈合作，却遭到恐怖分子袭击。对方发现遗失的病毒就在二帮家中，于是展开追踪。
面对接连而来的危机，原本胆小的二帮为了女儿和前妻，逐渐展现出少有的勇气与智慧，最终成功擒获犯罪分子，也重新赢回了家人的团圆。
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